现代发酵微生物实验技术

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现代发酵微生物实验技术

定价: ￥28.00元 金桥价: ￥26.60元 节省: ￥1.40元

出版/发行时间: 2005-04-01

出版社: 化学工业出版社

作者: 诸葛健

ISBN: 7-5025-6653-8

开本: 16

内容简介

本书是江南大学（原无锡轻工大学）生物工程学院工业微生物研究中心的集体创作，作者所在的发酵工程学科是我国最早授予的国家重点学科之一,参与编写者在教学与科研上都有较为丰富的实践经验和研究成果。全书共分七章，内容主要涉及显微技术、微生物细胞特殊结构的观察、噬菌体、标记菌种的获得与应用、原生质体系列育种技术、基因工程育种技术和固定化细胞生物转化等计81项实验。本书的编写有其特色，不仅图文并茂，而且有论述，有操作，有结果，还有某些新设备的介绍，特别是书中有关基因操作的技术内容，是与同类微生物实验技术书相比的新颖之处。适合高等院校微生物学、发酵工程、生物工程、食品工程等专业的高年级本科生及研究生使用，也可供相关科研人员参考。

目录
第一章显微技术1
第一节显微观察1
一、相差显微镜1
【实验11】相差显微镜的使用2
二、荧光显微镜5
【实验12】荧光显微镜的使用8
三、电子显微镜8
【实验13】细菌、酵母菌超薄切片的透射电镜观察12
【实验14】噬菌体的透射电镜观察14
【实验15】质粒DNA的透射电镜观察15
【实验16】酵母细胞的扫描电镜观察18
第二节显微摄影20
【实验17】显微摄影、菌落摄影和凝胶摄影21
第三节放射自显影25
【实验18】硝酸纤维素滤纸上标记DNA的放射自显影25
第四节显微操作技术用于单细胞分离27
【实验19】显微操纵仪用于单细胞分离29
【实验110】显微操纵仪用于酵母子囊的解剖及子囊孢子单孢化30
【实验111】玻璃微型工具的制作31

第二章微生物细胞特殊结构的观察33
第一节染色技术33
一、染色的基本原理33
二、染料34
三、染色36
【实验21】真菌的荧光染色与观察36
第二节细胞主要结构成分的分离与观察38
【实验22】革兰阳性细菌细胞壁的制备39
【实验23】酵母细胞壁甘露聚糖的制备41
【实验24】细胞壁的形态观察42
【实验25】革兰阴性菌细胞外膜蛋白的分离43
【实验26】细菌荚膜的观察44
【实验27】细菌鞭毛的观察45
【实验28】微生物细胞核的观察47
【实验29】细菌染色体DNA的分离与观察49
【实验210】异染颗粒的观察51
【实验211】酵母细胞内脂肪颗粒和肝糖颗粒的观察52
【实验212】酵母液泡及线粒体的提取54
第三节芽孢、子囊孢子和假菌丝的观察57
一、芽孢57
【实验213】细菌芽孢形成及发芽的观察59
【实验214】伴孢晶体的观察60
二、酵母子囊孢子61
【实验215】酵母子囊孢子的形成及观察63
【实验216】酵母单倍体的分离与鉴定64
三、酵母假菌丝66
【实验217】酵母假菌丝的观察66

第三章噬菌体69
【实验31】噬菌体的分离与纯化72
【实验32】高效价噬菌体原液的制备74
【实验33】溶源菌的鉴定75
【实验34】抗噬菌体产α淀粉酶菌株的选育77

第四章标记菌种的获得与应用79
第一节富集培养技术在获得标记菌种中的应用79
一、营养缺陷型富集法在原核细胞中的应用79
二、营养缺陷型富集法在真核细胞中的应用81
三、浓度梯度法富集抗性突变株82
四、富集法在研究次级代谢的重组DNA技术中的应用84
第二节营养缺陷型标记菌种的获得84
一、诱变方法85
二、淘汰野生型85
三、检出缺陷型85
四、营养缺陷型生长谱的确定87
【实验41】芽孢杆菌营养缺陷型的筛选89
【实验42】酵母营养缺陷型的筛选91
【实验43】青霉菌营养缺陷型菌株的筛选92
第三节呼吸缺陷型标记菌种的获得94
【实验44】酵母呼吸缺陷型的筛选94
第四节抗反馈调节抗性突变株的获得与应用95
【实验45】氨基酸抗反馈调节突变株的选育98

第五章原生质体系列育种技术101
第一节工业菌种育种的策略101
第二节原生质体融合育种102
一、原生质体融合育种的特点103
二、原生质体融合育种步骤与要点107
三、原生质体再生率和融合率的计算115
【实验51】芽孢杆菌的原生质体融合115
【实验52】链霉菌原生质体融合119
【实验53】小单胞菌的原生质体融合124
【实验54】酿酒酵母的原生质体融合125
【实验55】丝状真菌的原生质体融合128
第三节原生质体转化育种134
【实验56】芽孢杆菌原生质体转化134
【实验57】质粒DNA转化链霉菌原生质体137
【实验58】酿酒酵母的原生质体转化法138
【实验59】真菌原生质体转化139
第四节原生质体诱变育种141
【实验510】芽孢杆菌种间融合子F262原生质体诱变育种142
【实验511】紫外线诱变原生质体选育L谷氨酸高产菌143
第五节原生质体技术中的一些特殊技术145
一、紫外线照射原生质体增加融合率145
二、供体原生质体的热灭活146
三、原生质体电融合技术147
【实验512】电诱导酵母原生质体融合147
四、遗传转移148
【实验513】原生质体融合法转移酵母线粒体及杀伤质粒148

第六章基因工程育种技术151
第一节基因工程的基本过程和原理151
一、载体152
二、DNA重组用酶154
三、宿主细胞155
四、外源DNA156
第二节大肠杆菌基因工程160
一、大肠杆菌感受态细胞的制备和转化160
【实验61】用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌(Ⅰ)161
【实验62】用氯化钙制备感受态大肠杆菌（Ⅱ）162
【实验63】用PEG制备和转化大肠杆菌感受态细胞163
【实验64】大肠杆菌的电击转化164
二、大肠杆菌中质粒的提取与纯化166
【实验65】质粒的大量提取与纯化166
【实验66】质粒的小量提取168
【实验67】用硅胶膜分离法小量提取质粒169
三、微生物染色体DNA的提取与PCR扩增170
【实验68】枯草杆菌染色体DNA的提取170
【实验69】真菌染色体DNA的简易提取方法171
【实验610】枯草杆菌淀粉酶基因的PCR扩增173
【实验611】从电泳凝胶中分离枯草杆菌淀粉酶基因174
四、外源基因在大肠杆菌中的高表达175
【实验612】载体和基因的酶切180
【实验613】基因与载体的连接180
第三节非大肠杆菌微生物基因工程184
一、芽孢杆菌基因工程185
【实验614】枯草杆菌感受态细胞的制备和转化186
【实验615】地衣芽孢杆菌感受态细胞的诱导形成及其高效电转化187
【实验616】枯草杆菌转化子质粒的提取和检测188
【实验617】高碱性蛋白酶基因多拷贝重组菌的构建190
二、酵母基因工程194
【实验618】酵母染色体DNA的提取196
【实验619】酿酒酵母的乙酸锂完整细胞转化法197
【实验620】单链载体DNA的制备198
【实验621】酵母菌质粒DNA的提取199
【实验622】巴斯德毕赤酵母的电转化方法200
【实验623】羟酸还原异构酶基因多拷贝重组啤酒酵母的构建201

第七章微生物细胞固定化方法205
第一节载体结合法206
一、表面吸附法206
二、共价结合法207
第二节交联法208
第三节包埋法208
一、海藻酸钙凝胶包埋法209
【实验71】酿酒酵母的海藻酸钙固定化211
【实验72】固定化枯草杆菌连续生产耐热α淀粉酶213
二、κ角叉胶包埋法215
【实验73】κ角叉胶一步包埋法215
【实验74】κ角叉胶二步包埋法217
【实验75】固定化酵母连续生产酒精218
【实验76】固定化细胞的回收与活细胞计数219
三、聚丙烯酰胺凝胶包埋法219
【实验77】大肠杆菌的聚丙烯酰胺凝胶固定化220
四、光交联树脂前聚体包埋法221
【实验78】光交联树脂固定化原生质体221
五、其他载体包埋方法222
第四节几种固定化细胞方法联用224
一、包埋交联法224
二、吸附交联法225
三、包埋吸附法225
第五节其他固定化方法225
第六节固定化微生物细胞方法的选择226
一、固定化微生物细胞方法的选择226
二、固定化细胞技术的评价指标227
第七节微生物细胞固定化技术前景展望227
主要参考文献229

这件商品于 2005-05-31 添加.